(Flow cytometry, FCM) na anailisiche cealla a bhios a’ tomhas dèinead flùraiseachd comharran cealla dhathte. Is e teicneòlas àrdteicneòlais a th’ ann a chaidh a leasachadh stèidhichte air mion-sgrùdadh agus seòrsachadh cheallan singilte. Is urrainn dha meud, structar a-staigh, DNA, RNA, pròtanan, antigens agus feartan fiosaigeach no ceimigeach eile de cheallan a thomhas agus a sheòrsachadh, agus faodaidh iad a bhith stèidhichte air cruinneachadh nan seòrsachadh sin.
Tha sruth cytometer sa mhòr-chuid air a dhèanamh suas de na còig pàirtean a leanas:
1 Seòmar sruthadh agus siostam fluidics
2 Stòr solais laser agus siostam cumadh beam
3 Optical siostam
4 Siostam dealanach, stòraidh, taisbeanaidh agus anailis
5 siostam seòrsachaidh cealla
Nam measg, is e excitation laser anns an stòr solais laser agus siostam cruthachadh beam am prìomh thomhas de chomharran flùraiseach ann an cytometry sruthadh. Tha dian an t-solais excitation agus an ùine nochdaidh co-cheangailte ri cho dian sa tha an comharra fluorescence. Tha laser na stòr solais ciallach a bheir seachad soillseachadh aon-tonn, àrd-dian agus àrd-sheasmhachd. Is e an stòr solais excitation air leth freagarrach gus coinneachadh ris na riatanasan sin.
Tha dà lionsa siolandair eadar an stòr laser agus an seòmar sruthadh. Bidh na lionsan sin a’ cuimseachadh beam laser le crois-earrann cruinn air a sgaoileadh bhon stòr laser a-steach gu beam elliptical le crois-roinn nas lugha (22 μm × 66 μm). Tha an lùth laser taobh a-staigh an t-seam elliptical seo air a chuairteachadh a rèir cuairteachadh àbhaisteach, a’ dèanamh cinnteach à dian soillseachadh cunbhalach airson ceallan a tha a ’dol tron raon lorg laser. Air an làimh eile, tha an siostam optigeach air a dhèanamh suas de ghrunn sheata de lionsan, pinholes, agus sìoltachain, a dh’ fhaodar a roinn gu garbh ann an dà bhuidheann: suas an abhainn agus sìos an abhainn den t-seòmar sruthadh.
Tha an siostam optigeach air beulaibh an t-seòmair-sruth air a dhèanamh suas de lionsa agus pinhole. Is e prìomh obair an lens agus an toll prìne (mar as trice dà lionsa agus toll prìne) an beam laser a chuimseachadh le crois-earrann cruinn air a sgaoileadh leis an stòr laser a-steach do ghiùlan elliptical le crois-roinn nas lugha. Bidh seo a’ cuairteachadh an lùth leusair a rèir cuairteachadh àbhaisteach, a’ dèanamh cinnteach à dian soillseachadh cunbhalach airson ceallan thairis air an raon lorg laser agus a’ lughdachadh casg bho sholas air seachran.
Tha trì prìomh sheòrsan sìoltachain ann:
1: Criathrag pas fada (LPF) - dìreach a’ leigeil le solas le tonnan nas àirde na luach sònraichte a dhol troimhe.
2: Criathrag pas-ghoirid (SPF) - dìreach a’ leigeil le solas le tonnan fo luach sònraichte a dhol troimhe.
3: Criathrag bandpass (BPF) - dìreach a’ leigeil le solas ann an raon tonn-tonn sònraichte a dhol troimhe.
Faodaidh measgachadh eadar-dhealaichte de shìoltachain comharran flùraiseachd a stiùireadh aig diofar thonnan gu tiùban photomultiplier fa leth (PMTn). Mar eisimpleir, is e LPF550 agus BPF525 na sìoltachain airson fluorescence uaine (FITC) a lorg air beulaibh PMT. Is e na sìoltachain a thathas a’ cleachdadh gus fluorescence orains-dearg (PE) a lorg air beulaibh am PMT LPF600 agus BPF575. Is e na sìoltachain airson a bhith a’ lorg fluorescence dearg (CY5) air beulaibh an PMT LPF650 agus BPF675.
Tha cytometry sruthadh air a chleachdadh sa mhòr-chuid airson rèiteach cealla. Le adhartas teicneòlas coimpiutaireachd, leasachadh imdhun-eòlas agus innleachd teicneòlas antibody monoclonal, tha na tagraidhean aige ann am bith-eòlas, cungaidh-leigheis, bùth-leigheadaireachd agus raointean eile a’ sìor fhàs nas fharsainge. Tha na tagraidhean sin a’ toirt a-steach mion-sgrùdadh daineamaigs cealla, apoptosis cealla, taidhpeadh cealla, breithneachadh tumhair, mion-sgrùdadh èifeachd dhrogaichean, msaa.
Ùine puist: Sultain-21-2023
